Immunoassaig

Il·lustració dels components bàsics d'un immunoassaig, que inclou un analit (verd), un anticòs (negre) i una etiqueta detectable (groc)
MeSH	D007118

Un immunoassaig és un conjunt de tècniques immunoquímiques analítiques de laboratori que tenen en comú l'usar complexos immunes, és a dir els resultants de la conjugació de anticossos i antígens, com a referències de quantificació d'un anàlit (substància objecte d'anàlisi) determinat, que pot ser l'anticòs (Ac) o un antigen (Ag), usant per al mesurament una molècula com a marcador que fa part de la reacció amb el complex immune a la prova o assaig químic .^[1]

La tècnica es basa en la gran especificitat i afinitat dels anticossos pels seus antígens específics i es fan servir els anticossos monoclonals (obtinguts al laboratori) o de sèrums policlonals (obtinguts d'animals), sent més específics els monoclonals.

La seva gran sensibilitat i especificitat permet la quantificació de compostos presents en líquids orgànics en concentració reduïda, de l'ordre de nanograms/ml o de picograms/ml.

El desenvolupament de l'immunoassaig ha tingut gran impacte en el camp de la diagnosi mèdic mitjançant proves de laboratori o química clínica.

A Rosalyn Sussman Yalow i Solomon Berson se'ls atribueix el desenvolupament dels primers immunoassaigs en la dècada de 1950. Yalow va acceptar el Premi Nobel de Medicina o Fisiologia el 1977 pel seu treball en inmunoassaigs, convertint-se en la segona dona nord-americana a guanyar el premi.^[2]

Els immunoassaigs es van tornar considerablement més simples de realitzar i més populars quan es van demostrar tècniques per enzims lligades químicament a anticossos a finals de la dècada de 1960.^[3]

El 1983, el professor Anthony Campbell de la Universitat de Cardiff va reemplaçar el iode radioactiu utilitzat en el immunoassaig per un èster de acridinio que produeix la seva pròpia llum: la quimioluminiscència.^[4] Aquest tipus d'immunoassaig s'utilitza ara en al voltant de 100 milions de proves clíniques cada any a tot el món, el que permet als metges mesurar una àmplia gamma de proteïnes, patògens i altres molècules en mostres de sang.^[5]

El 2012, la indústria de immunoassaigs comercials guanyar US $ 17000000000 i es pensava que tenia perspectives d'un creixement anual lent en el rang de el 2 a el 3 per cent.^[6]

• Competitiu: el Antigen (Ag) objecte del mesurament competeix amb un antigen marcat per un anticòs (Ac). Es mesura per la quantitat de l'antigen marcat sense conjugar que es considera és inversament proporcional a l'analit.

• No competitiu (anomenat també tipus sandvitx): el Ag de la mostra reacciona amb dues Ac diferents que es fixen a diferents parts de l'Ag. Un dels Ac generalment està en suport sòlid per facilitar la separació de la fracció lligada, i l'altre Ac porta la marca. Es mesura per la quantitat de el marcador considerant que és directament proporcional a la quantitat de l'analit.

• Homogeni: En aquest tipus d'assaig senyal generat per la unió de l'antigen i l'anticòs es mesura directament en el mateix mitjà que s'utilitza per afavorir la formació del complex immune.

• Heterogeni: En aquest tipus d'assaig senyal generat per la unió de l'antigen i l'anticòs es mesura en un mitjà diferent que l'utilitzat per a la unió del complex immune, generalment impliquen una etapa intermèdia de rentat per eliminar interferències.

Es considera que els immunoassaigs amb format homogeni no competitiu són els més sensibles i específics.

• Radioimmunoassaig (RIA) : El marcador és un isòtop radioactiu.
• Enzimoinmunoanàlisi (EIA): el marcador és un enzim com ara la tècnica de enzimoimmunoassaig conegut per la seva abreviatura ELISA.
• Fluoroinmunoanàlisi: el marcador és una molècula fluorescent, per exemple FPIA .
• Assaig Inmunoquimioluminiscent: la marca és en general un enzim capaç de catalitzar una reacció quimioluminiscent. Són tant o més sensibles que els radioinmunoassaigs, i no presenten riscos de manipulació de substàncies radioactives. En contraposició estan poc desenvolupats i no sempre és possible aplicar-los.

Una àmplia gamma de proves mèdiques són immunoassaigs, anomenats inmuno-diagnòstics en aquest context. Moltes proves d'embaràs casolanes són immunoassaigs, que detecten el marcador d'embaràs gonadotropina coriònica humana. Altres immunoassaigs clínics inclouen proves que mesuren els nivells de CK-MB per avaluar la malaltia cardíaca, insulina per avaluar la hipoglucèmia, antigen prostàtic específic (PSA) en el maneig de patologia prostàtica i alguns també s'usen per la detecció i / o mesurament quantitatiu d'alguns compostos farmacèutics.

• Mesura de nivells d'hormones: per exemple el mesurament de nivells de hormones tiroïdals o de estrògens
• Mesura de metabòlits en sèrum la quantitat o presència són indicis de dany cel·lular: Per exemple el mesurament de marcadors biològics miocàrdics com les troponines
• Detecció de virus: per exemple dels causants de hepatitis i la seva individualització
• Detecció de l'càncer o de cèl·lules tumorals: a través de les seves proteïnes o marcadors tumorals, alliberats en el sèrum dels pacients.
• Detectar exposició a agents infecciosos: per exemple de rubèola o toxoplasmosi en dones embarassades o en persones inmunosuprimides.
• Detecció de metabòlits indicadors de problemes fisiològics, per la seva presència o quantitat excessiva, a la sang : Per exemple en cas d'anèmia es mesura nivells de ferritina.
• Mesurar nivells de medicaments, drogues objecte d'abús i toxines en sang.

• Immunocromatografia
• Serologia